Po kraujagyslių pažeidimo būtina efektyvus kraujo krešėjimas, norint sustabdyti kraujavimą. Tačiau kai kuriems asmenims šis procesas yra neveiksmingas dėl paveldimų veiksnių. Pavyzdžiui, hemofilija B atsiranda dėl IX krešėjimo faktoriaus (FIX) trūkumo, kuris gali sukelti ilgalaikį kraujavimą po sužalojimų ar operacijos.
Taigi pacientams, sergantiems H hemofilija B, dažnai gydomi rekombinantine taisymu kaip pakaitinę terapiją, ir nors šis požiūris pagerino hemofilijos B gydymą, patvirtintų produktų pusinės eliminacijos laikas plazmoje yra tik apie 3–4 dienas, todėl reikia dažnai injekcijų. Todėl reikalaujama rekombinantinių fiksavimo produktų su patobulinta plazmos pusinės eliminacijos laikas, leidžiantis dozuoti retesnį dozavimą.
Atliktame tyrimeGamtos ryšiaiOslo universiteto ir Alessio Branchini/Mirko Pinotti universiteto profesoriaus Jano Terje Anderseno laboratorijos Feraros universitete (Italija) pristato ilgai veikiančių žmogaus albuminų fiksuotų fiksuotų variantų projektavimą ir apibūdinimą, kuriame kiekvienas pasižymi unikaliomis farmakokinetinėmis savybėmis.
Pažanga buvo įmanoma naudojant inžinerinį žmogaus albumino variantą su trimis aminorūgščių pakaitalais: E505Q/T527M/K573P (QMP), padidėjus nuo pH priklausomo prisijungimo prie naujagimio FC receptoriaus (FCRN), ląstelių receptorių, kritiškų albumino homeostazei. Šis albumino variantas buvo sujungtas su inžineriniais taisymo variantais, o gautos molekulės buvo išplėstos, bet skirtingos plazmos pusinės eliminacijos laikas.
Hiperaktyvus fiksuotas R338L (Padua) aminorūgščių pakeitimas buvo įtrauktas kartu su papildomu modifikacija, daranti įtaką FIX sąveikai su ekstravaskuliniu kolageno IV rezervuaru. Tiksliau, lizinas (K5) buvo pakeistas alaninu (K5A) arba argininu (K5R). Tai moduliuoja surišimo afinitetą tarp taisymo ir kolageno IV, nes K5A sumažina, o K5R padidina sąveiką.
Pažymėtina, kad Paduvos pakaitalas neutralizuoja sumažėjusį K5A varianto aktyvumą, nes buvo stebimas hiperaktyvumas visose albuminais suliejusiose fiksuotose susiliejimuose, kuriuose yra fiksuotas Padua. Svarbu tai, kad inžineriniai taisymo variantai buvo veiksmingai suskaidyti iš albumino, kai suaktyvėjo FXIA, o tai būtina optimaliam koagulianto aktyvumui.
Be to, nors pakaitinės terapijos veiksmingumas paprastai įvertinamas atsižvelgiant į fiksuotą aktyvumą plazmoje, svarbu atsižvelgti į tai, kad fiksavimas taip pat jungiasi su ekstravaskuliniu kolagenu IV, o tai prisideda prie bendro kraujo krešėjimo efektyvumo. Hemofilijos B pelių modelio tyrimai parodė, kad fiksuotas K5R aminorūgščių pakeitimas sustiprino Padua fiksuoto albumino QMP ekstravaskulinį pasiskirstymą. Modifikacija iš tikrųjų pagerino tiek pasiskirstymą, tiek funkcinį pusinės eliminacijos periodą tris kartus.
Todėl dėl šios inžinerijos buvo sukurtas terapinis kandidatas, kuriam būdingas patobulintas biologinis pasiskirstymas ir palankus funkcinis profilis. Priešingai, „Paduvos“ fiksavimo variantas su K5A aminorūgščių pakaitalu parodė nereikšmingą ekstravaskulinį pasiskirstymą, tuo pačiu pasižymi didžiausiu plazmos lygiu ankstyvaisiais laiko momentais, o po to greitai sumažėjo.
Apibendrinant, šie išvados patvirtina inžinerinio albumino (QMP) panaudojimą „Padua K5A“ ir „Padua K5R“ kaip hiperaktyvias galimybes atitinkamai trumpalaikei ar ilgalaikei terapijai, suteikiant galimybę suasmeninti hemofilijos B pakaitinę terapiją.
„Prieš patobulinimus gydant, pacientams, sergantiems H hemofilija B, ypač pacientais, kuriems yra sunkūs atvejai, žymiai sumažino gyvenimo trukmę, dažnai pasiduodami tokioms komplikacijoms kaip nekontroliuojami intrakranijiniai kraujavimas ar sąnarių kraujavimas, prieš pasiekiant suaugusįjį. Tačiau dideli biotechnologiniai pertraukos per dešimtmečius paskatino vystytis pakartotiniam gydymui.
„Nepaisant šių pažangų, išlieka nemaža galimybė patobulinti fiuro produktų dizainą, ypač siekiant pagerinti profilaktinių režimų laikymą Tokie biologija valdomi baltymų dizainai gali paruošti kelią labiau suasmenintiems gydymo galimybėms “,-sako profesorius Janas Terje Andersenas.