Prinstono universitetas ir bendradarbiai sukūrė „Shine-TB“, vieno mėginio, lygiagrečią reakcijos amplifikaciją ir aptikimo CRISPR tyrimą, kuris nustato Mycobacterium tuberculosis tiesiogiai iš skreplių, pasiekdamas 100% jautrumą (6 iš 6) ir 100% specifiškumo (7 iš 7), palyginti su kultūra 13 akiniais klinikiniais mėginiais.
Tuberkuliozė (TB), kurią sukelia M. tuberculosis, kelia didelę grėsmę pasaulinei sveikatai ir ją sunku diagnozuoti. Dabartinė TB diagnostika susiduria su jautrumo, apsisukimo laiko ir prieinamumo kompromisais. Kultūros metodai yra labai jautrūs, tačiau lėti. Smulkių tepinėlio mikroskopija yra greita (~ 1 valandos valandos), tačiau ji turi ribotą jautrumą ir specifiškumą bei priklauso nuo papildomos vartotojo patirties.
PGR pagrįsti testai, tokie kaip XPERT MTB/RIF, yra jautrūs, tačiau jiems reikia specializuotų instrumentų ir patentuotų vienkartinių kasečių. Nepatenkintas nešiojamojo, jautraus priežiūros TB diagnostikos poreikis, esant mažai išteklių nustatymams.
Tyrimo metu „Racionalus CRISPR pagrįstas tuberkuliozės aptikimo testas tiesiogiai iš skreplių“, paskelbtas IN, paskelbtas IN Mokslo pažangatyrėjai sujungė rekombinazės polimerazės amplifikaciją su CAS13A ir Cas12A aptikimu, kad būtų sukurti du lygiagretiai vieno POT tyrimai, nustatantys du konservuotus MTB elementus (IS6110 ir IS1081) ir žmogaus DNR vidinę kontrolę.
Klinikinio patvirtinimo skrepliai buvo surinkti iš simptominių suaugusiųjų dviejuose viešuose pirminės sveikatos priežiūros tinkluose Cali mieste, Kolumbijoje. Papildomas TB neigiamas skreplis, naudojamas atliekant eksperimentus, buvo surinktas Universiteto ligoninėje Niuarke, NJ.
Tyrime buvo naudojamas dvigubas įprastų TB sekos pakartojimų aptikimas (IS6110 ir IS1081) kartu su žmogaus DNR vidine kontrole. Vieno puodo reakcijos, esant 37 ° C, suporuotai izoterminę amplifikaciją su CRISPR rodmeniu. Skaito apdorojimas laikėsi supaprastinto metodo, skirto išvengti specializuotos įrangos.
Klinikiniai 13 aklųjų skreplių mėginių tyrimai atskleidė 100% jautrumą (n = 6) ir 100% (n = 7) specifiškumą, palyginti su kultūra. Analizėje nustatyta, kad M. tuberculosis H37RV padermėje yra 69,0 CFU/ml aptikimo ir 80,5 CFU/ml H37RV padermės M. BOVIS BCG smaigalyje skrepliuose, be jokio kryžminio reaktyvumo įvairiems bakterijoms ar grybeliniams izoliatams.
„Genexpert Ultra“ tame pačiame rinkinyje parodė 100% jautrumą ir 86% specifiškumą, palyginti su kultūra.
Tyrimo autoriai daro išvadą, kad „Shine-TB“ supaprastina TB diagnozę nuo mėginio iki atsakymo, derinant amplifikaciją ir aptikimą viename, o rezultatus galima nuskaityti ant paprastos popierinės juostelės ir liofilizacijos (šaldymo džiovinimas), todėl bandymo rinkinius galima laikyti ir gabenti be šaldiklio.
Pranešta, kad Pasaulio sveikatos organizacijos tikslinio produkto profilio etalonai yra ≥85% jautrumo, esant beveik priežiūros taškui ir ≥ 90% jautrumui, atliekant TB mažo paprastumo testus, turint galimybių beveik nejudant 37 ° C temperatūrai.
Parašė mūsų autorius Justinas Jacksonas, redagavo Sadie Harley, ir faktas patikrintas ir apžvelgtas Roberto Egano-šis straipsnis yra kruopštaus žmogaus darbo rezultatas. Mes pasikliaujame tokiais skaitytojais kaip jūs, kad išlaikytume nepriklausomą mokslo žurnalistiką. Jei ši ataskaita yra svarbi jums, apsvarstykite paaukojimą (ypač kas mėnesį). Gausite be skelbimų sąskaita kaip padėka.
© 2025 Science X tinklas