Dartmouth Hitchcock medicinos centro mokslininkai sukūrė būdą, kaip Laimo ligą diagnozuoti anksčiau ir tiksliau nei tradiciniai tyrimo metodai.
Per pastaruosius 30 metų Laimo liga daugėjo Jungtinėse Valstijose, ypač šiaurės rytų regione, kur Borrelia burgdorferi bakteriją nešiojančios erkės aktyvios nuo vėlyvo pavasario iki ankstyvo rudens. Negydoma Laimo liga gali sukelti sąnarių, širdies ir nervų sistemos komplikacijų.
Nors būdingas į jaučio akį panašus bėrimas yra ankstyvas ligos požymis, jis pasireiškia tik apie 25 % pacientų. Daugeliui pacientų atsiranda odos pažeidimų, imituojančių kitas ligas, o tai apsunkina klinikinę diagnozę. Dar labiau apsunkina diagnozę, antikūnų tyrimai dažnai rodo klaidingus neigiamus rezultatus per pirmąsias kelias infekcijos savaites.
Siekdami išspręsti šias diagnostikos komplikacijas, Naujojo Hampšyro Dartmuto Hitchcock medicinos centro mokslininkai sukūrė naują Borrelia burgdorferi aptikimo būdą, leidžiantį greičiau ir tiksliau diagnozuoti. Guohong (Grace) Huang, mokslų daktarė, vadovavo projektui ir pristatė darbą Molekulinės patologijos asociacijos (AMP) 2025 metiniame susitikime ir parodoje, vykusiame lapkričio 11–15 d. Bostone.
Projektas prasidėjo nuo bylos, kurioje dalyvavo 73 metų moteris, kuri per ketverius metus patyrė laipsnišką odos sukietėjimą ir uždegimą bei sąnarių nejudrumą. Gydytojai iš pradžių manė, kad pacientas serga morfėja – liga, dėl kurios atsiranda kietų, sustorėjusių odos dėmių. Tačiau imunosupresantai, vartojami morfėjai gydyti, nepagerino paciento simptomų.
Šiuo atveju antikūnų tyrimas parodė tik ankstesnę Laimo infekciją, tačiau ji teigiamai reagavo į antibiotiką doksicikliną – vaistą, dažniausiai vartojamą Laimo ligai gydyti.
Shaofeng Yan, MD, Ph.D., pacientų priežiūros komandos narys, paprašė, kad Huango skyrius parengtų naują molekulinį testą, patvirtinantį Borrelia burgdorferi buvimą, todėl buvo atliktas didesnis tyrimas, pateiktas Huango abstrakčioje.
Komanda, įskaitant mokslų daktarą Joelą A. Leffertsą, sukūrė tris lašelių skaitmeninius PGR (ddPCR) testus, kurie naudojami tiksliems ir labai jautriems matavimams nustatyti, kad nustatytų įvairių tipų Borrelia bakterijas: vieną, kuri aptinka visas Borrelia rūšis, vieną, kuri yra skirta už Laimo ligą atsakingoms ligoms, ir vieną, skirtą Borrelia burgdorferi, kuri yra pagrindinė Laimo ligos priežastis JAV.
Išbandžius ribotą skaičių odos mėginių iš pacientų, sergančių patvirtinta arba įtariama Laimo liga, nauji tyrimai parodė puikų tikslumą ir galėjo aptikti nuo penkių iki dešimties bakterijų ląstelių.
Galiausiai jos komandos sukurtas Borrelia burgdorferi testas buvo įvertintas 90,9 % jautrumo formalinu fiksuotuose, parafino įterptuose mėginiuose, todėl tai gali būti naujas būdas tirti Laimo ligą. Tikimasi, kad jautrumas padidės naudojant šviežius arba šaldytus audinius, kurie paprastai duoda didesnio kiekio ir kokybės DNR.
„Naudodami ddPCR tyrimą, šio paciento odos biopsijoje sėkmingai aptikome B. burgdorferi DNR“, – sakė Huangas. „Šią išvadą dar labiau patvirtino DNR sekos nustatymas, patvirtinantis lėtinės Laimo ligos diagnozę.
Huangas pažymėjo, kad tradiciniai serologiniai tyrimai negali atskirti aktyvios infekcijos ir ankstesnio poveikio.
„Antikūnų lygis gali išlikti padidėjęs net ir po sėkmingo gydymo. Tai dar vienas klinikinis scenarijus, kai ddPCR tyrimas suteikia aiškų pranašumą nustatant aktyvų bakterijų buvimą, o ne pasikliaujant netiesioginiais imuniniais žymenimis”, – sakė Huangas.
Nors pacientui prireikė daugiau nei ketverių metų, kol buvo nustatyta galutinė diagnozė, Huang ir jos komandos sukurtas testas gali išgelbėti būsimus pacientus nuo tokio ilgo laukimo. Ankstyva diagnozė yra labai svarbi siekiant sumažinti ilgalaikių komplikacijų riziką. Toliau tobulinant komandos testą, greitas gydymas bus įmanomas daugiau pacientų.
„Siekiant paspartinti šį darbą, kitas žingsnis yra išplėsti bandymus iki daugelio atvejų ir ištirti strategijas, kaip dar labiau padidinti tyrimo jautrumą“, – sakė Huangas.
Šiam darbui vadovavo Guohong (Grace) Huang, mokslų daktarė, klinikinės genomikos ir pažangiųjų technologijų laboratorijoje (CGAT), Dartmouth Hitchcock medicinos centre.
Pateikė Molekulinės patologijos asociacija